Реактив «Трио» представляет собой однофазный раствор, содержащий фенол, тиоцианат гуанидина, буферные компоненты и специальные добавки. Он разработан для эффективного выделения тотальной РНК методом кислой фенол-хлороформной экстракции с использованием гуанидинтиоцианата.
Реактив доступен в различных форматах: наборы рассчитаны на 25, 100, 500 или 1000 выделений , что делает их удобными для лабораторий любого масштаба — от небольших исследовательских групп до крупных научных центров.
Принцип метода
Реактив «Трио» основан на классической методике Chomczynski и Sacchi (1987), дополненной современными усовершенствованиями. Метод гуанидинтиоцианат-фенол-хлороформной экстракции является одним из наиболее универсальных способов выделения РНК, позволяя работать с широким спектром образцов, включая:
- Ткани растений (листья, семена, корни);
- Животные ткани (кровь, органы, клетки);
- Мицелий и плодовые тела грибов;
- Бактериальные культуры;
- Образцы сложного состава (например, почва, пищевые продукты).
Механизм действия:
- Стабилизация РНК: Реактив мгновенно инактивирует РНКазы, предотвращая деградацию РНК.
- Лизис клеток: Компоненты раствора эффективно разрушают клеточные мембраны и стенки, высвобождая нуклеиновые кислоты.
- Фазовое разделение: После добавления хлороформа смесь разделяется на водную фазу (содержащую РНК) и органическую фазу (содержащую белки и ДНК). Это позволяет изолировать чистую РНК, свободную от примесей.
Преимущества реактива «Трио»
- Универсальность: Подходит для работы с образцами различной природы и сложности.
- Высокое качество РНК: Эффективное удаление белков, ДНК и других загрязнителей обеспечивает надежные результаты в последующих анализах.
- Простота использования: Протокол оптимизирован для минимального количества этапов и времени работы.
- Широкий диапазон применения: Идеально подходит для исследований в области молекулярной биологии, медицины, экологии и биотехнологии.
Области применения
- Выделение тотальной РНК для анализа экспрессии генов (qPCR, RNA-seq).
- Исследование микробных сообществ и метатранскриптомов.
- Анализ образцов сложного состава (например, почвы, растительных тканей или пищевых продуктов).
- Клинические исследования, требующие высококачественной РНК.
Заключение
Реактив «Трио» — это надежный и универсальный инструмент для выделения РНК высокого качества. Его эффективность, простота использования и широкий спектр применения делают его незаменимым в современных лабораториях, занимающихся молекулярной биологией и биомедицинскими исследованиями.